Related articles
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNC86011 |
---|---|---|---|
規格 | 10x100ul/50x100ul | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
DB3.1化學感受態細胞
產品規格CAT#: BFNC86011-01(10×100ul)/BFNC86011-02(50×100ul)
DB3.1: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存條件(保質期): -80℃(6個月)
基因型
F- gyrA462 endA1 glnV44 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) ara14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (SmR) xyl5 Δleu mtl1
DB3.1化學感受態細胞
產品說明
DB3.1大腸桿菌菌株基因組中含有gyrA462基因,賦予其對ccdB毒性基因的抗性,特別適用于構建或擴繁含有ccdB基因的質粒載體 (例GATEWAY System vector),此菌株具有鏈霉素抗性。
青旗生物生產的DB3.1感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19檢測轉化效率>108 cfu/μg DNA。
操作方法
1. DB3.1感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應
抗生素的2YT或LB培養基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
注意事項
1. 感受態細胞適宜在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入目的DNA時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少終用于涂板的菌量。