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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNC86008 |
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規格 | 10x100ul/50x100ul | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
XL1-Blue化學感受態細胞
產品規格CAT#: BFNC86008-01(10×100ul)/BFNC86008-02(50×100ul)
XL1-Blue: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存條件(保質期): -80℃(6個月)
基因型
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1 lac [F' proAB lacIqZ?M15: Tn10 (TetR)]
產品說明
XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失,增強了外源DNA的穩定性和提取質量。 lacIqZΔM15 的存在使XL1-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素抗性。
青旗生物生產的XL1-Blue感受態細胞經特殊工藝制作,pUC19質粒檢測轉化效率>109cfu/μg DNA。
XL1-Blue化學感受態細胞
操作方法
1. XL1-Blue感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質?;蜻B接產物) 并用手bo打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
注意事項
1. 感受態細胞適宜在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少終用于涂板的菌量。